Dược điển Trung Quốc (phiên bản 2020) yêu cầu chiết xuất metanol của YCH không được nhỏ hơn 20,0% [2], không có chỉ số đánh giá chất lượng nào khác được chỉ định. Kết quả của nghiên cứu này cho thấy hàm lượng chiết xuất metanol của mẫu tự nhiên và mẫu trồng đều đạt tiêu chuẩn dược điển và không có sự khác biệt đáng kể giữa chúng. Do đó, không có sự khác biệt rõ ràng về chất lượng giữa các mẫu hoang dã và mẫu trồng trọt, theo chỉ số đó. Tuy nhiên, hàm lượng tổng sterol và tổng flavonoid trong các mẫu hoang dã cao hơn đáng kể so với mẫu nuôi cấy. Phân tích chuyển hóa sâu hơn cho thấy sự đa dạng chất chuyển hóa phong phú giữa các mẫu hoang dã và mẫu được nuôi cấy. Ngoài ra, 97 chất chuyển hóa khác nhau đáng kể đã được sàng lọc, được liệt kê trongBảng bổ trợ S2. Trong số các chất chuyển hóa khác nhau đáng kể này có β-sitosterol (ID là M397T42) và dẫn xuất quercetin (M447T204_2), được báo cáo là hoạt chất. Các thành phần chưa được báo cáo trước đây, chẳng hạn như trigonelline (M138T291_2), betaine (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenone (M241T189), arctiin (M557T165) và axit loganic (M399T284_2), cũng được đưa vào trong số các chất chuyển hóa khác biệt. Các thành phần này đóng nhiều vai trò khác nhau trong việc chống oxy hóa, chống viêm, loại bỏ các gốc tự do, chống ung thư và điều trị xơ vữa động mạch và do đó, có thể tạo thành các thành phần hoạt động mới được giả định trong YCH. Hàm lượng hoạt chất quyết định hiệu quả và chất lượng của dược liệu [7]. Tóm lại, chiết xuất metanol là chỉ số đánh giá chất lượng YCH duy nhất có một số hạn chế và cần phải khám phá thêm các dấu hiệu chất lượng cụ thể hơn. Có sự khác biệt đáng kể về tổng sterol, tổng flavonoid và hàm lượng của nhiều chất chuyển hóa khác biệt giữa YCH hoang dã và YCH được trồng; vì vậy, có thể có một số khác biệt về chất lượng giữa chúng. Đồng thời, các hoạt chất tiềm năng mới được phát hiện trong YCH có thể có giá trị tham khảo quan trọng cho việc nghiên cứu cơ sở chức năng của YCH và phát triển hơn nữa tài nguyên YCH.
Tầm quan trọng của dược liệu chính hãng từ lâu đã được công nhận ở khu vực xuất xứ cụ thể để sản xuất thuốc thảo dược Trung Quốc có chất lượng tuyệt vời [
8]. Chất lượng cao là một thuộc tính thiết yếu của dược liệu chính hãng và môi trường sống là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến chất lượng của dược liệu đó. Kể từ khi YCH bắt đầu được sử dụng làm thuốc, nó đã bị YCH hoang dã thống trị từ lâu. Sau khi giới thiệu và thuần hóa thành công YCH ở Ninh Hạ vào những năm 1980, nguồn dược liệu Yinchaihu dần dần chuyển từ YCH hoang dã sang YCH được trồng trọt. Theo một cuộc điều tra trước đây về nguồn YCH [
9] và điều tra thực địa của nhóm nghiên cứu của chúng tôi, có sự khác biệt đáng kể về khu vực phân bố của dược liệu được trồng và hoang dã. YCH hoang dã phân bố chủ yếu ở Khu tự trị Ninh Hạ Hui của tỉnh Thiểm Tây, tiếp giáp với khu vực khô cằn Nội Mông và miền trung Ninh Hạ. Đặc biệt, thảo nguyên sa mạc ở những khu vực này là môi trường sống thích hợp nhất cho sự phát triển của YCH. Ngược lại, YCH được trồng chủ yếu phân bố ở phía nam của khu vực phân bố hoang dã, chẳng hạn như Quận Tongxin (Trồng trọt I) và các khu vực xung quanh, đã trở thành cơ sở sản xuất và trồng trọt lớn nhất ở Trung Quốc và Quận Pengyang (Trồng trọt II) , nằm ở khu vực phía Nam hơn và là một khu vực sản xuất YCH được trồng khác. Hơn nữa, môi trường sống của hai vùng canh tác trên không phải là thảo nguyên sa mạc. Do đó, ngoài phương thức sản xuất, còn có sự khác biệt đáng kể về môi trường sống của YCH hoang dã và YCH được trồng trọt. Môi trường sống là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến chất lượng dược liệu. Môi trường sống khác nhau sẽ ảnh hưởng đến sự hình thành và tích lũy các chất chuyển hóa thứ cấp trong thực vật, từ đó ảnh hưởng đến chất lượng dược phẩm [
10,
11]. Do đó, sự khác biệt đáng kể về hàm lượng tổng flavonoid và tổng số sterol cũng như biểu hiện của 53 chất chuyển hóa mà chúng tôi tìm thấy trong nghiên cứu này có thể là kết quả của sự khác biệt về quản lý đồng ruộng và môi trường sống.
Một trong những cách chính mà môi trường ảnh hưởng đến chất lượng dược liệu là gây căng thẳng cho cây trồng nguồn. Căng thẳng môi trường vừa phải có xu hướng kích thích sự tích tụ các chất chuyển hóa thứ cấp [
12,
13]. Giả thuyết cân bằng tăng trưởng/biệt hóa cho biết rằng, khi được cung cấp đủ chất dinh dưỡng, thực vật chủ yếu phát triển, trong khi khi thiếu chất dinh dưỡng, thực vật chủ yếu biệt hóa và tạo ra nhiều chất chuyển hóa thứ cấp hơn [
14]. Căng thẳng hạn hán do thiếu nước là căng thẳng môi trường chính mà thực vật phải đối mặt ở những vùng khô cằn. Trong nghiên cứu này, điều kiện nước của YCH trồng trọt phong phú hơn, với lượng mưa hàng năm cao hơn đáng kể so với YCH hoang dã (cung cấp nước cho cây trồng I gấp khoảng 2 lần so với cây hoang dã; nước trồng trọt II gấp khoảng 3,5 lần so với cây hoang dã). ). Ngoài ra, đất ở môi trường hoang dã là đất cát, còn đất ở đất nông nghiệp lại là đất sét. So với đất sét, đất cát có khả năng giữ nước kém và dễ làm trầm trọng thêm tình trạng hạn hán. Đồng thời, quá trình canh tác thường đi kèm với việc tưới nước nên mức độ stress hạn thấp. YCH hoang dã phát triển trong môi trường sống khô cằn tự nhiên khắc nghiệt và do đó nó có thể phải chịu áp lực hạn hán nghiêm trọng hơn.
Điều hòa áp suất thẩm thấu là một cơ chế sinh lý quan trọng giúp thực vật đối phó với căng thẳng do hạn hán, và các ancaloit là chất điều hòa thẩm thấu quan trọng ở thực vật bậc cao [
15]. Betaines là các hợp chất amoni bậc bốn alkaloid hòa tan trong nước và có thể hoạt động như chất bảo vệ thẩm thấu. Căng thẳng hạn hán có thể làm giảm khả năng thẩm thấu của tế bào, trong khi chất bảo vệ thẩm thấu bảo tồn và duy trì cấu trúc và tính toàn vẹn của các đại phân tử sinh học, đồng thời làm giảm hiệu quả thiệt hại do căng thẳng hạn hán gây ra cho thực vật [
16]. Ví dụ, dưới áp lực hạn hán, hàm lượng betaine trong củ cải đường và Lycium barbarum tăng đáng kể [
17,
18]. Trigonelline là chất điều chỉnh sự phát triển của tế bào và dưới áp lực hạn hán, nó có thể kéo dài thời gian của chu kỳ tế bào thực vật, ức chế sự phát triển của tế bào và dẫn đến co rút thể tích tế bào. Sự gia tăng tương đối nồng độ chất tan trong tế bào cho phép cây đạt được sự điều hòa thẩm thấu và tăng cường khả năng chống lại stress hạn hán [
19]. GIA X [
20] phát hiện ra rằng, với sự gia tăng căng thẳng hạn hán, Astragalus membranaceus (một nguồn y học cổ truyền Trung Quốc) sản xuất nhiều trigonelline hơn, có tác dụng điều chỉnh tiềm năng thẩm thấu và cải thiện khả năng chống lại căng thẳng hạn hán. Flavonoid cũng đã được chứng minh là đóng một vai trò quan trọng trong khả năng chống chịu hạn hán của thực vật [
21,
22]. Một số lượng lớn các nghiên cứu đã xác nhận rằng căng thẳng hạn hán vừa phải có lợi cho sự tích tụ flavonoid. Lang Duo-Yong và cộng sự. [
23] đã so sánh tác động của căng thẳng hạn hán đối với YCH bằng cách kiểm soát khả năng giữ nước trên đồng ruộng. Người ta nhận thấy rằng stress hạn hán đã ức chế sự phát triển của rễ ở một mức độ nhất định, nhưng trong điều kiện hạn hán vừa và nghiêm trọng (khả năng giữ nước trên đồng 40%), tổng hàm lượng flavonoid trong YCH tăng lên. Trong khi đó, dưới áp lực hạn hán, phytosterol có thể hoạt động để điều chỉnh tính lưu động và tính thấm của màng tế bào, ức chế mất nước và cải thiện khả năng chống stress [
24,
25]. Do đó, sự tích lũy tổng số flavonoid, tổng số sterol, betaine, trigonelline và các chất chuyển hóa thứ cấp khác trong YCH hoang dã có thể liên quan đến căng thẳng hạn hán cường độ cao.
Trong nghiên cứu này, phân tích làm giàu con đường KEGG được thực hiện trên các chất chuyển hóa được phát hiện là có sự khác biệt đáng kể giữa YCH hoang dã và YCH được trồng trọt. Các chất chuyển hóa được làm giàu bao gồm những chất tham gia vào con đường chuyển hóa ascorbate và aldarate, sinh tổng hợp aminoacyl-tRNA, chuyển hóa histidine và chuyển hóa beta-alanine. Những con đường trao đổi chất này có liên quan chặt chẽ đến cơ chế chống chịu stress của thực vật. Trong số đó, chuyển hóa ascorbate đóng vai trò quan trọng trong sản xuất chất chống oxy hóa thực vật, chuyển hóa carbon và nitơ, khả năng chống stress và các chức năng sinh lý khác [
26]; Sinh tổng hợp aminoacyl-tRNA là một con đường quan trọng để hình thành protein [
27,
28], tham gia vào quá trình tổng hợp các protein kháng stress. Cả hai con đường histidine và β-alanine đều có thể nâng cao khả năng chống chịu của thực vật với stress môi trường [
29,
30]. Điều này càng chỉ ra rằng sự khác biệt về chất chuyển hóa giữa YCH hoang dã và YCH được trồng có liên quan chặt chẽ đến quá trình kháng stress.
Đất là cơ sở vật chất cho sự sinh trưởng và phát triển của cây thuốc. Đạm (N), lân (P) và kali (K) trong đất là những nguyên tố dinh dưỡng quan trọng cho sự sinh trưởng và phát triển của cây trồng. Chất hữu cơ trong đất còn chứa N, P, K, Zn, Ca, Mg và các nguyên tố đa lượng, vi lượng cần thiết cho cây thuốc. Thừa hoặc thiếu chất dinh dưỡng, hoặc tỷ lệ chất dinh dưỡng không cân đối sẽ ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển và chất lượng dược liệu, mỗi loại cây trồng có nhu cầu dinh dưỡng khác nhau.
31,
32,
33]. Ví dụ, nồng độ N thấp đã thúc đẩy quá trình tổng hợp các ancaloit ở Isatis indigotica và có lợi cho sự tích lũy flavonoid ở thực vật như Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge và Dichondra repens Forst. Ngược lại, quá nhiều N sẽ ức chế sự tích tụ flavonoid ở các loài như Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis và Ginkgo biloba, đồng thời ảnh hưởng đến chất lượng dược liệu [
34]. Việc bón phân P có hiệu quả trong việc tăng hàm lượng axit glycyrrhizic và dihydroacetone trong cam thảo Ural [
35]. Khi lượng ứng dụng vượt quá 0·12 kg·m−2, tổng hàm lượng flavonoid ở Tussilago farfara giảm [
36]. Việc bón phân P có tác động tiêu cực đến hàm lượng polysaccharide trong rhizoma Polygonati trong y học cổ truyền Trung Quốc [
37], nhưng phân K có hiệu quả trong việc tăng hàm lượng saponin [
38]. Bón phân 450 kg·hm−2 K là tốt nhất cho sự sinh trưởng và tích lũy saponin của cây Panax notoginseng hai tuổi [
39]. Theo tỷ lệ N:P:K = 2:2:1 thì tổng lượng dịch chiết thủy nhiệt, harpagide và harpagoside là cao nhất [
40]. Tỷ lệ N, P và K cao có lợi cho việc thúc đẩy sự phát triển của Pogostemon cablin và tăng hàm lượng dầu dễ bay hơi. Tỷ lệ N, P và K thấp làm tăng hàm lượng các thành phần chính có tác dụng trong dầu lá thân cây Pogostemon cablin [
41]. YCH là loại cây chịu được đất cằn cỗi và có thể có những yêu cầu cụ thể về các chất dinh dưỡng như N, P và K. Trong nghiên cứu này, so với YCH được trồng, đất của cây YCH hoang dã tương đối cằn cỗi: hàm lượng đất về chất hữu cơ, tổng N, tổng P và tổng K lần lượt bằng khoảng 1/10, 1/2, 1/3 và 1/3 so với cây trồng. Do đó, sự khác biệt về chất dinh dưỡng trong đất có thể là một lý do khác dẫn đến sự khác biệt giữa các chất chuyển hóa được phát hiện trong YCH được trồng và hoang dã. Weibao Ma và cộng sự. [
42] nhận thấy rằng việc bón một lượng phân N và phân P nhất định đã cải thiện đáng kể năng suất và chất lượng của hạt giống. Tuy nhiên, ảnh hưởng của các yếu tố dinh dưỡng đến chất lượng YCH chưa rõ ràng và các biện pháp bón phân nhằm nâng cao chất lượng dược liệu cần được nghiên cứu thêm.
Thuốc thảo dược Trung Quốc có đặc điểm là “Môi trường sống thuận lợi thúc đẩy năng suất và môi trường sống không thuận lợi nâng cao chất lượng” [
43]. Trong quá trình chuyển đổi dần dần từ YCH hoang dã sang YCH được trồng trọt, môi trường sống của thực vật đã thay đổi từ thảo nguyên sa mạc khô cằn và cằn cỗi sang đất nông nghiệp màu mỡ với nhiều nước hơn. Môi trường sống của YCH được trồng tốt hơn và năng suất cao hơn, rất hữu ích để đáp ứng nhu cầu thị trường. Tuy nhiên, môi trường sống ưu việt này đã dẫn đến những thay đổi đáng kể trong các chất chuyển hóa của YCH; Liệu điều này có lợi cho việc cải thiện chất lượng YCH hay không và làm thế nào để đạt được sản xuất YCH chất lượng cao thông qua các biện pháp canh tác dựa trên cơ sở khoa học sẽ cần phải nghiên cứu thêm.
Canh tác môi trường sống mô phỏng là một phương pháp mô phỏng môi trường sống và điều kiện môi trường của cây thuốc hoang dã, dựa trên kiến thức về sự thích nghi lâu dài của thực vật với những áp lực môi trường cụ thể [
43]. Bằng cách mô phỏng các yếu tố môi trường khác nhau ảnh hưởng đến thực vật hoang dã, đặc biệt là môi trường sống ban đầu của thực vật được sử dụng làm nguồn dược liệu đích thực, phương pháp này sử dụng thiết kế khoa học và sự can thiệp sáng tạo của con người để cân bằng sự tăng trưởng và trao đổi chất thứ cấp của cây thuốc Trung Quốc [
43]. Các phương pháp này nhằm mục đích đạt được sự sắp xếp tối ưu để phát triển dược liệu chất lượng cao. Canh tác môi trường sống mô phỏng sẽ cung cấp một cách hiệu quả để sản xuất YCH chất lượng cao ngay cả khi cơ sở dược lực học, dấu hiệu chất lượng và cơ chế phản ứng với các yếu tố môi trường không rõ ràng. Theo đó, chúng tôi đề xuất rằng các biện pháp quản lý đồng ruộng và thiết kế khoa học trong trồng trọt và sản xuất YCH nên được thực hiện dựa trên các đặc điểm môi trường của YCH hoang dã, chẳng hạn như điều kiện đất khô cằn, cằn cỗi và cát. Đồng thời, cũng hy vọng các nhà nghiên cứu sẽ tiến hành nghiên cứu chuyên sâu hơn về cơ sở vật chất chức năng và các dấu hiệu chất lượng của YCH. Những nghiên cứu này có thể cung cấp các tiêu chí đánh giá hiệu quả hơn cho YCH và thúc đẩy sản xuất chất lượng cao và phát triển bền vững của ngành.