-
Tinh dầu lá khuynh diệp nguyên chất tự nhiên Aromatherapy chăm sóc da và cơ thể
Phương pháp chiết xuất hoặc chế biến: chưng cất bằng hơi nước
Chưng cất Phần chiết xuất: lá
Nguồn gốc quốc gia: Trung Quốc
Ứng dụng: Khuếch tán/hương liệu/massage
Thời hạn sử dụng: 3 năm
Dịch vụ tùy chỉnh: nhãn và hộp tùy chỉnh hoặc theo yêu cầu của bạn
Chứng nhận: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Tinh dầu khuynh diệp phản ứng với chất nhầy và làm loãng chất nhầy, giúp giảm nhanh chóng tình trạng khó thở và các vấn đề hô hấp khác. Nó đủ mạnh để hoạt động như một chất xua đuổi côn trùng. Khi được sử dụng trong liệu pháp hương thơm, nó giúp đầu óc minh mẫn. Lợi ích trị liệu của nó đến từ các đặc tính kháng khuẩn, kháng nấm, sát trùng, chống co thắt và kháng virus. Sử dụng tinh dầu khuynh diệp cho nhiều vấn đề về da và sức khỏe. Tinh dầu khuynh diệp chứa eucalyptol, còn được gọi là cineole. Hợp chất này sẽ hỗ trợ sức khỏe tổng thể của bạn.
-
Tinh dầu oải hương hữu cơ nguyên chất tự nhiên dùng để chăm sóc da bằng liệu pháp hương thơm
Phương pháp chiết xuất hoặc chế biến: Chưng cất bằng hơi nước
Phần chiết xuất chưng cất: Hoa
Nguồn gốc quốc gia: Trung Quốc
Ứng dụng: Khuếch tán/hương liệu/massage
Thời hạn sử dụng: 3 năm
Dịch vụ tùy chỉnh: nhãn và hộp tùy chỉnh hoặc theo yêu cầu của bạn
Chứng nhận: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
Tinh dầu Magnoliae Officmalis Cortex hữu cơ nguyên chất 100% tự nhiên dùng để chăm sóc da
Hương thơm của Hou Po ban đầu có vị đắng và cay nồng, sau đó dần dần mở ra với vị ngọt ngào, ấm áp như siro.
Hầu Pha có tính tương sinh với Thổ và Kim, vị đắng ấm của nó có tác dụng hạ khí và thông thấp. Nhờ những đặc tính này, nó được dùng trong y học Trung Quốc để giảm ứ trệ và tích tụ trong đường tiêu hóa, cũng như ho và khò khè do đờm tắc nghẽn phổi.
Mộc lan là một loài cây rụng lá có nguồn gốc từ vùng núi và thung lũng Tứ Xuyên, Hồ Bắc và các tỉnh khác của Trung Quốc. Vỏ cây thơm nồng được sử dụng trong y học cổ truyền Trung Quốc được tách ra từ thân, cành và rễ. Thu hái vào tháng 4 đến tháng 6. Vỏ cây dày, nhẵn, chứa nhiều dầu, có màu tím ở mặt trong và sáng bóng như pha lê.
Người hành nghề có thể cân nhắc kết hợp Hou Po với tinh dầu Qing Pi làm hương đầu bổ sung trong hỗn hợp nhằm mục đích phá vỡ sự tích tụ.
-
Gói tùy chỉnh OEM Dầu rễ cây đại đầu to tự nhiên
Là một tác nhân hóa trị liệu hiệu quả, 5-fluorouracil (5-FU) được ứng dụng rộng rãi trong điều trị các khối u ác tính ở đường tiêu hóa, đầu, cổ, ngực và buồng trứng. 5-FU là thuốc điều trị ung thư đại trực tràng hàng đầu tại các cơ sở y tế. Cơ chế tác dụng của 5-FU là ngăn chặn sự chuyển hóa axit nucleic uracil thành axit nucleic thymine trong tế bào khối u, từ đó ảnh hưởng đến quá trình tổng hợp và sửa chữa DNA và RNA để đạt được tác dụng gây độc tế bào (Afzal và cộng sự, 2009; Ducreux và cộng sự, 2015; Longley và cộng sự, 2003). Tuy nhiên, 5-FU cũng gây ra tiêu chảy do hóa trị (CID), một trong những phản ứng phụ phổ biến nhất gây khó chịu cho nhiều bệnh nhân (Filho và cộng sự, 2016). Tỷ lệ tiêu chảy ở những bệnh nhân được điều trị bằng 5-FU lên tới 50%–80%, ảnh hưởng nghiêm trọng đến tiến độ và hiệu quả của hóa trị liệu (Iacovelli và cộng sự, 2014; Rosenoff và cộng sự, 2006). Do đó, việc tìm ra liệu pháp điều trị hiệu quả cho CID do 5-FU gây ra là vô cùng quan trọng.
Hiện nay, các biện pháp can thiệp không dùng thuốc và can thiệp bằng thuốc đã được đưa vào điều trị lâm sàng CID. Các biện pháp can thiệp không dùng thuốc bao gồm chế độ ăn uống hợp lý và bổ sung muối, đường và các chất dinh dưỡng khác. Các loại thuốc như loperamide và octreotide thường được sử dụng trong liệu pháp chống tiêu chảy của CID (Benson và cộng sự, 2004). Ngoài ra, y học dân tộc cũng được áp dụng để điều trị CID bằng liệu pháp độc đáo của riêng họ ở nhiều quốc gia. Y học cổ truyền Trung Quốc (TCM) là một loại y học dân tộc điển hình đã được thực hành trong hơn 2000 năm ở các nước Đông Á bao gồm Trung Quốc, Nhật Bản và Hàn Quốc (Qi và cộng sự, 2010). TCM cho rằng thuốc hóa trị liệu sẽ kích hoạt tiêu thụ Qi, tỳ hư, dạ dày mất cân bằng và ẩm ướt nội sinh, dẫn đến rối loạn chức năng dẫn truyền của ruột. Trong lý thuyết của TCM, chiến lược điều trị CID chủ yếu nên dựa vào việc bổ sung Qi và tăng cường Tỳ (Wang và cộng sự, 1994).
Rễ khô củaAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) vàNhân sâm PanaxCA Mey. (PG) là những vị thuốc thảo dược điển hình trong Đông y có cùng tác dụng bổ khí và bổ tỳ (Li và cộng sự, 2014). AM và PG thường được sử dụng như một cặp thảo dược (dạng đơn giản nhất của sự tương hợp thảo dược Trung Quốc) với tác dụng bổ khí và bổ tỳ để điều trị tiêu chảy. Ví dụ, AM và PG đã được ghi nhận trong các bài thuốc trị tiêu chảy kinh điển như Thần Linh Bách Chu Tam, Tứ Quân Tử Đường từThái Bình Huimin Heji Ju Fang(Triều đại nhà Tống, Trung Quốc) và Bu Zhong Yi Qi Tang từPi Wei Lun(Triều Nguyên, Trung Quốc) (Hình 1). Một số nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng cả ba công thức đều có khả năng làm giảm CID (Bai và cộng sự, 2017; Chen và cộng sự, 2019; Gou và cộng sự, 2016). Ngoài ra, nghiên cứu trước đây của chúng tôi cho thấy Viên nang Thần Châu chỉ chứa AM và PG có tiềm năng tác dụng trong điều trị tiêu chảy, viêm đại tràng (hội chứng Xiexie) và các bệnh đường tiêu hóa khác (Feng và cộng sự, 2018). Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu nào thảo luận về tác dụng và cơ chế của AM và PG trong điều trị CID, dù dùng phối hợp hay đơn lẻ.
Hiện nay, hệ vi khuẩn đường ruột được coi là một yếu tố tiềm năng trong việc hiểu cơ chế điều trị của Y học cổ truyền Trung Quốc (Feng và cộng sự, 2019). Các nghiên cứu hiện đại chỉ ra rằng hệ vi khuẩn đường ruột đóng vai trò quan trọng trong việc duy trì cân bằng nội môi đường ruột. Hệ vi khuẩn đường ruột khỏe mạnh góp phần bảo vệ niêm mạc ruột, chuyển hóa, cân bằng nội môi và đáp ứng miễn dịch, và ức chế tác nhân gây bệnh (Thursby và Juge, 2017; Pickard và cộng sự, 2017). Hệ vi khuẩn đường ruột bị rối loạn làm suy yếu các chức năng sinh lý và miễn dịch của cơ thể con người một cách trực tiếp hoặc gián tiếp, gây ra các phản ứng phụ như tiêu chảy (Patel và cộng sự, 2016; Zhao và Shen, 2010). Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng 5-FU làm thay đổi đáng kể cấu trúc của hệ vi khuẩn đường ruột ở chuột bị tiêu chảy (Li và cộng sự, 2017). Do đó, tác động của AM và PM đối với bệnh tiêu chảy do 5-FU gây ra có thể được trung gian bởi hệ vi khuẩn đường ruột. Tuy nhiên, liệu AM và PG đơn lẻ hay kết hợp có thể ngăn ngừa tiêu chảy do 5-FU gây ra bằng cách điều chỉnh hệ vi khuẩn đường ruột hay không vẫn chưa được biết rõ.
Để nghiên cứu tác dụng chống tiêu chảy và cơ chế cơ bản của AM và PG, chúng tôi đã sử dụng 5-FU để mô phỏng mô hình tiêu chảy ở chuột. Ở đây, chúng tôi tập trung vào các tác dụng tiềm tàng của việc dùng đơn lẻ và kết hợp (AP) củaAtractylodes macrocephalatinh dầu (AMO) vàNhân sâm Panaxtổng saponin (PGS), các thành phần hoạt tính được chiết xuất lần lượt từ AM và PG, đối với bệnh tiêu chảy, bệnh lý đường ruột và cấu trúc vi khuẩn sau hóa trị liệu 5-FU.
-
100% Tinh dầu khuynh diệp tự nhiên nguyên chất cho việc chăm sóc da
Đỗ trọng (Eucommia ulmoides)(EU) (thường được gọi là “Du Zhong” trong tiếng Trung) thuộc họ Đỗ trọng, một chi cây gỗ nhỏ có nguồn gốc từ miền Trung Trung Quốc [1]. Loại cây này được trồng rộng rãi ở Trung Quốc trên diện rộng vì tầm quan trọng về mặt y học. Khoảng 112 hợp chất đã được phân lập từ cây này, bao gồm lignan, iridoid, phenolic, steroid và các hợp chất khác. Công thức thảo dược bổ sung của cây này (chẳng hạn như trà thơm) đã cho thấy một số đặc tính dược liệu. Lá cây này có hoạt tính cao hơn liên quan đến vỏ, hoa và quả [2,3]. Lá của EU được cho là có tác dụng tăng cường sức mạnh của xương và cơ thể [4], do đó dẫn đến tuổi thọ và thúc đẩy khả năng sinh sản ở con người [5]. Công thức trà thơm ngon làm từ lá EU được báo cáo là có tác dụng giảm mỡ và tăng cường chuyển hóa năng lượng. Các hợp chất flavonoid (như rutin, axit chlorogenic, axit ferulic và axit caffeic) được báo cáo là có hoạt tính chống oxy hóa trong lá EU [6].
Mặc dù đã có đủ tài liệu về đặc tính hóa thực vật của EU, nhưng vẫn còn ít nghiên cứu về đặc tính dược lý của các hợp chất khác nhau được chiết xuất từ vỏ, hạt, thân và lá của EU. Bài báo tổng quan này sẽ làm sáng tỏ thông tin chi tiết về các hợp chất khác nhau được chiết xuất từ các bộ phận khác nhau của EU (vỏ, hạt, thân và lá) và triển vọng sử dụng các hợp chất này trong các đặc tính tăng cường sức khỏe với bằng chứng khoa học, từ đó cung cấp tài liệu tham khảo cho việc ứng dụng EU.
-
Tinh dầu Houttuynia cordata nguyên chất tự nhiên Dầu Houttuynia Cordata Dầu Lchthammolum
Ở hầu hết các nước đang phát triển, 70-95% dân số dựa vào y học cổ truyền để chăm sóc sức khỏe ban đầu và trong số đó 85% người dân sử dụng thực vật hoặc chiết xuất của chúng làm hoạt chất.[1] Việc tìm kiếm các hợp chất hoạt tính sinh học mới từ thực vật thường phụ thuộc vào thông tin dân tộc và dân gian cụ thể thu thập được từ các bác sĩ địa phương và vẫn được coi là một nguồn quan trọng để khám phá thuốc. Ở Ấn Độ, có khoảng 2000 loại thuốc có nguồn gốc thực vật.[2] Trước sự quan tâm rộng rãi về việc sử dụng cây thuốc, bài đánh giá hiện tại vềHouttuynia cordataThunb. cung cấp thông tin mới nhất liên quan đến các nghiên cứu về thực vật, thương mại, dược lý dân tộc, hóa thực vật và dược lý xuất hiện trong tài liệu.H. cordataThunb. thuộc về gia đìnhHọ Saururaceaevà thường được gọi là đuôi thằn lằn Trung Quốc. Đây là một loại thảo mộc lâu năm có thân rễ dạng thân bò có hai kiểu hình hóa học riêng biệt.[3,4] Kiểu hình hóa học của loài này ở Trung Quốc được tìm thấy trong điều kiện hoang dã và bán hoang dã ở Đông Bắc Ấn Độ từ tháng 4 đến tháng 9.[5,6,7]H. cordatacó sẵn ở Ấn Độ, đặc biệt là ở thung lũng Brahmaputra của Assam và được nhiều bộ tộc ở Assam sử dụng dưới dạng rau cũng như cho nhiều mục đích y học theo truyền thống.
-
Nhà sản xuất dầu Arctium lappa 100% nguyên chất – Dầu Arctium lappa vôi tự nhiên có Chứng chỉ đảm bảo chất lượng
Lợi ích sức khỏe
Rễ ngưu bàng thường được ăn, nhưng cũng có thể được phơi khô và pha trà. Nó hoạt động tốt như một nguồn inulin, mộtchất tiền sinh họcChất xơ hỗ trợ tiêu hóa và cải thiện sức khỏe đường ruột. Ngoài ra, loại rễ này còn chứa flavonoid (chất dinh dưỡng thực vật),hóa chất thực vậtvà chất chống oxy hóa được biết là có lợi cho sức khỏe.
Ngoài ra, rễ cây ngưu bàng còn có thể mang lại những lợi ích khác như:
Giảm viêm mãn tính Rễ cây ngưu bàng chứa một số chất chống oxy hóa, chẳng hạn như quercetin, axit phenolic và luteolin, có thể giúp bảo vệ tế bào của bạn khỏicác gốc tự do. Các chất chống oxy hóa này giúp giảm viêm khắp cơ thể.
Rủi ro sức khỏe
Rễ ngưu bàng được coi là an toàn để ăn hoặc uống như trà. Tuy nhiên, loại cây này rất giống với cây cà độc dược (belladonna nightshade), một loại cây có độc. Khuyến cáo chỉ nên mua rễ ngưu bàng từ những người bán đáng tin cậy và không tự ý thu hái. Ngoài ra, có rất ít thông tin về tác dụng của rễ ngưu bàng đối với trẻ em hoặc phụ nữ mang thai. Hãy tham khảo ý kiến bác sĩ trước khi sử dụng rễ ngưu bàng cho trẻ em hoặc nếu bạn đang mang thai.
Sau đây là một số rủi ro sức khỏe khác có thể xảy ra khi sử dụng rễ cây ngưu bàng:
Tăng mất nước
Rễ ngưu bàng hoạt động như một chất lợi tiểu tự nhiên, có thể dẫn đến mất nước. Nếu bạn đang dùng thuốc lợi tiểu hoặc các loại thuốc lợi tiểu khác, bạn không nên dùng rễ ngưu bàng. Nếu bạn đang dùng các loại thuốc này, điều quan trọng là phải lưu ý các loại thuốc, thảo dược và thành phần khác có thể dẫn đến mất nước.
Phản ứng dị ứng
Nếu bạn nhạy cảm hoặc có tiền sử dị ứng với hoa cúc, cỏ phấn hương hoặc hoa cúc vạn thọ, bạn sẽ có nguy cơ dị ứng với rễ cây ngưu bàng cao hơn.
-
Giá sỉ số lượng lớn 100% tinh khiết AsariRadix Et Rhizoma dầu Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Các nghiên cứu trên động vật và trong ống nghiệm đã điều tra tác dụng kháng nấm, kháng viêm và tim mạch tiềm tàng của sassafras và các thành phần của nó. Tuy nhiên, các thử nghiệm lâm sàng còn thiếu, và sassafras không được coi là an toàn để sử dụng. Safrole, thành phần chính của vỏ rễ và tinh dầu sassafras, đã bị Cục Quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) cấm, bao gồm cả việc sử dụng làm hương liệu hoặc hương liệu, và không nên sử dụng bên trong hoặc bên ngoài cơ thể vì nó có khả năng gây ung thư. Safrole đã được sử dụng trong sản xuất bất hợp pháp 3,4-methylene-dioxymethamphetamine (MDMA), còn được gọi là "thuốc lắc" hoặc "Molly", và việc bán safrole và tinh dầu sassafras đang được Cục Quản lý Thực thi Ma túy Hoa Kỳ giám sát.
-
Giá sỉ số lượng lớn 100% tinh dầu Stellariae Radix nguyên chất (mới) Liệu pháp hương thơm thư giãn Khuynh diệp globulus
Dược điển Trung Quốc (phiên bản năm 2020) yêu cầu chiết xuất methanol của YCH không được nhỏ hơn 20,0% [2], không có chỉ số đánh giá chất lượng nào khác được chỉ định. Kết quả nghiên cứu này cho thấy hàm lượng chiết xuất methanol của các mẫu hoang dã và nuôi cấy đều đạt tiêu chuẩn dược điển, và không có sự khác biệt đáng kể giữa chúng. Do đó, không có sự khác biệt rõ ràng về chất lượng giữa các mẫu hoang dã và nuôi cấy, theo chỉ số đó. Tuy nhiên, hàm lượng sterol tổng số và flavonoid tổng số trong các mẫu hoang dã cao hơn đáng kể so với các mẫu nuôi cấy. Phân tích chuyển hóa tiếp theo cho thấy sự đa dạng phong phú của các chất chuyển hóa giữa các mẫu hoang dã và nuôi cấy. Ngoài ra, 97 chất chuyển hóa khác biệt đáng kể đã được sàng lọc, được liệt kê trongBảng bổ sung S2. Trong số các chất chuyển hóa khác biệt đáng kể này có β-sitosterol (ID là M397T42) và các dẫn xuất quercetin (M447T204_2), đã được báo cáo là các thành phần hoạt tính. Các thành phần chưa được báo cáo trước đây, chẳng hạn như trigonelline (M138T291_2), betaine (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenone (M241T189), arctiin (M557T165) và axit loganic (M399T284_2), cũng được bao gồm trong số các chất chuyển hóa khác biệt. Các thành phần này đóng nhiều vai trò khác nhau trong việc chống oxy hóa, chống viêm, loại bỏ gốc tự do, chống ung thư và điều trị xơ vữa động mạch, và do đó, có thể tạo thành các thành phần hoạt tính mới được cho là có trong YCH. Hàm lượng hoạt chất quyết định hiệu quả và chất lượng của dược liệu [7]. Tóm lại, chiết xuất methanol, là chỉ số đánh giá chất lượng YCH duy nhất, có một số hạn chế, và cần được khám phá thêm các dấu hiệu chất lượng cụ thể hơn. Có sự khác biệt đáng kể về tổng sterol, tổng flavonoid và hàm lượng của nhiều chất chuyển hóa khác biệt giữa YCH hoang dã và YCH trồng trọt; do đó, có khả năng có một số khác biệt về chất lượng giữa chúng. Đồng thời, các hoạt chất tiềm năng mới được phát hiện trong YCH có thể có giá trị tham chiếu quan trọng cho việc nghiên cứu cơ sở chức năng của YCH và việc phát triển hơn nữa các nguồn tài nguyên YCH.
Tầm quan trọng của các nguyên liệu thuốc chính hãng từ lâu đã được công nhận ở khu vực xuất xứ cụ thể để sản xuất các loại thuốc thảo dược Trung Quốc có chất lượng tuyệt vời [8]. Chất lượng cao là một thuộc tính thiết yếu của dược liệu chính hãng, và môi trường sống là một yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến chất lượng của những dược liệu này. Kể từ khi YCH bắt đầu được sử dụng làm thuốc, nó đã từ lâu bị chi phối bởi YCH hoang dã. Sau khi YCH được du nhập và thuần hóa thành công ở Ninh Hạ vào những năm 1980, nguồn dược liệu Yinchaihu dần chuyển từ hoang dã sang YCH được nuôi trồng. Theo một cuộc điều tra trước đây về nguồn gốc của YCH [9] và cuộc điều tra thực địa của nhóm nghiên cứu của chúng tôi, có sự khác biệt đáng kể về khu vực phân bố của dược liệu trồng trọt và hoang dã. YCH hoang dã chủ yếu phân bố ở Khu tự trị dân tộc Hồi Ninh Hạ thuộc tỉnh Thiểm Tây, giáp với vùng khô cằn Nội Mông và trung tâm Ninh Hạ. Đặc biệt, thảo nguyên sa mạc ở những khu vực này là môi trường sống thích hợp nhất cho sự phát triển của YCH. Ngược lại, YCH trồng trọt chủ yếu phân bố ở phía nam của khu vực phân bố hoang dã, chẳng hạn như huyện Đồng Tâm (Trồng trọt I) và các khu vực xung quanh, nơi đã trở thành cơ sở trồng trọt và sản xuất lớn nhất ở Trung Quốc, và huyện Bành Dương (Trồng trọt II), nằm ở khu vực phía nam hơn và là một khu vực sản xuất khác của YCH trồng trọt. Hơn nữa, môi trường sống của hai khu vực trồng trọt trên không phải là thảo nguyên sa mạc. Do đó, ngoài phương thức sản xuất, còn có sự khác biệt đáng kể về môi trường sống của YCH hoang dã và trồng trọt. Môi trường sống là một yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến chất lượng của dược liệu. Các môi trường sống khác nhau sẽ ảnh hưởng đến sự hình thành và tích lũy các chất chuyển hóa thứ cấp trong thực vật, từ đó ảnh hưởng đến chất lượng của các sản phẩm thuốc [10,11]. Do đó, sự khác biệt đáng kể về hàm lượng flavonoid tổng số và sterol tổng số cũng như biểu hiện của 53 chất chuyển hóa mà chúng tôi tìm thấy trong nghiên cứu này có thể là kết quả của sự khác biệt về quản lý thực địa và môi trường sống.Một trong những cách chính mà môi trường ảnh hưởng đến chất lượng dược liệu là thông qua việc gây áp lực lên cây trồng nguồn. Áp lực môi trường vừa phải có xu hướng kích thích sự tích tụ các chất chuyển hóa thứ cấp [12,13]. Giả thuyết cân bằng tăng trưởng/phân hóa nêu rằng, khi chất dinh dưỡng được cung cấp đầy đủ, thực vật chủ yếu phát triển, trong khi khi chất dinh dưỡng bị thiếu, thực vật chủ yếu phân hóa và sản xuất nhiều chất chuyển hóa thứ cấp hơn [14]. Căng thẳng hạn hán do thiếu nước là căng thẳng môi trường chính mà thực vật ở các vùng khô cằn phải đối mặt. Trong nghiên cứu này, tình trạng nước của YCH trồng trọt dồi dào hơn, với lượng mưa hàng năm cao hơn đáng kể so với YCH hoang dã (lượng nước cung cấp cho YCH trồng trọt I cao gấp khoảng 2 lần so với YCH hoang dã; YCH trồng trọt II cao gấp khoảng 3,5 lần so với YCH hoang dã). Ngoài ra, đất trong môi trường hoang dã là đất cát, nhưng đất trong đất nông nghiệp là đất sét. So với đất sét, đất cát có khả năng giữ nước kém và có nhiều khả năng làm trầm trọng thêm căng thẳng hạn hán. Đồng thời, quá trình canh tác thường đi kèm với việc tưới nước, do đó mức độ căng thẳng hạn hán thấp. YCH hoang dã phát triển trong môi trường sống khô cằn tự nhiên khắc nghiệt, do đó nó có thể bị căng thẳng hạn hán nghiêm trọng hơn.Điều hòa thẩm thấu là một cơ chế sinh lý quan trọng mà thực vật dùng để đối phó với tình trạng căng thẳng do hạn hán, và ancaloit là chất điều hòa thẩm thấu quan trọng ở thực vật bậc cao [15]. Betaine là hợp chất amoni bậc bốn alkaloid tan trong nước và có thể hoạt động như chất bảo vệ thẩm thấu. Căng thẳng hạn hán có thể làm giảm khả năng thẩm thấu của tế bào, trong khi chất bảo vệ thẩm thấu bảo tồn và duy trì cấu trúc và tính toàn vẹn của các đại phân tử sinh học, đồng thời giảm thiểu hiệu quả thiệt hại do căng thẳng hạn hán gây ra cho cây trồng [16]. Ví dụ, dưới áp lực hạn hán, hàm lượng betaine trong củ cải đường và Lycium barbarum tăng lên đáng kể [17,18]. Trigonelline là chất điều hòa sinh trưởng tế bào, và trong điều kiện hạn hán, nó có thể kéo dài chu kỳ tế bào thực vật, ức chế sinh trưởng tế bào và làm giảm thể tích tế bào. Sự gia tăng tương đối nồng độ chất tan trong tế bào cho phép cây đạt được sự điều hòa thẩm thấu và tăng cường khả năng chống chịu hạn hán [19]. GIA X [20] phát hiện ra rằng, khi căng thẳng hạn hán gia tăng, Hoàng kỳ (một nguồn dược liệu của y học cổ truyền Trung Quốc) sản xuất nhiều trigonelline hơn, có tác dụng điều hòa thế năng thẩm thấu và cải thiện khả năng chống chịu hạn hán. Flavonoid cũng đã được chứng minh là đóng vai trò quan trọng trong khả năng chống chịu hạn hán của thực vật [21,22]. Một số lượng lớn các nghiên cứu đã xác nhận rằng căng thẳng hạn hán vừa phải có lợi cho sự tích tụ flavonoid. Lang Duo-Yong et al. [23] đã so sánh tác động của hạn hán lên YCH bằng cách kiểm soát khả năng giữ nước trên đồng ruộng. Kết quả cho thấy hạn hán ức chế sự phát triển của rễ ở một mức độ nhất định, nhưng ở hạn hán vừa và nặng (khả năng giữ nước trên đồng ruộng là 40%), hàm lượng flavonoid tổng số trong YCH tăng lên. Đồng thời, trong điều kiện hạn hán, phytosterol có thể điều chỉnh tính lưu động và tính thấm của màng tế bào, ức chế sự mất nước và cải thiện khả năng chống chịu hạn.24,25]. Do đó, sự tích tụ gia tăng của tổng số flavonoid, tổng số sterol, betaine, trigonelline và các chất chuyển hóa thứ cấp khác trong YCH hoang dã có thể liên quan đến tình trạng căng thẳng hạn hán cường độ cao.Trong nghiên cứu này, phân tích làm giàu con đường KEGG đã được thực hiện trên các chất chuyển hóa được phát hiện có sự khác biệt đáng kể giữa YCH hoang dã và YCH được trồng. Các chất chuyển hóa được làm giàu bao gồm các chất tham gia vào các con đường chuyển hóa ascorbate và aldarate, sinh tổng hợp aminoacyl-tRNA, chuyển hóa histidine và chuyển hóa beta-alanine. Các con đường chuyển hóa này có liên quan chặt chẽ đến các cơ chế kháng stress của thực vật. Trong số đó, chuyển hóa ascorbate đóng vai trò quan trọng trong sản xuất chất chống oxy hóa ở thực vật, chuyển hóa carbon và nitơ, khả năng kháng stress và các chức năng sinh lý khác [26]; quá trình tổng hợp aminoacyl-tRNA là một con đường quan trọng để hình thành protein [27,28], tham gia vào quá trình tổng hợp protein kháng stress. Cả con đường histidine và β-alanine đều có thể tăng cường khả năng chịu đựng của thực vật đối với stress môi trường [29,30]. Điều này chỉ ra thêm rằng sự khác biệt về chất chuyển hóa giữa YCH hoang dã và YCH được nuôi trồng có liên quan chặt chẽ đến quá trình kháng cự căng thẳng.Đất là nền tảng vật chất cho sự sinh trưởng và phát triển của cây thuốc. Đạm (N), lân (P) và kali (K) trong đất là những nguyên tố dinh dưỡng quan trọng cho sự sinh trưởng và phát triển của cây. Chất hữu cơ trong đất cũng chứa N, P, K, Zn, Ca, Mg và các nguyên tố đa lượng và vi lượng khác cần thiết cho cây thuốc. Việc thừa hay thiếu chất dinh dưỡng, hoặc tỷ lệ dinh dưỡng không cân đối, sẽ ảnh hưởng đến sự sinh trưởng và phát triển cũng như chất lượng của dược liệu, và mỗi loại cây có nhu cầu dinh dưỡng khác nhau [31,32,33]. Ví dụ, stress N thấp thúc đẩy quá trình tổng hợp ancaloit ở Isatis indigotica và có lợi cho sự tích tụ flavonoid ở các loài thực vật như Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge và Dichondra repens Forst. Ngược lại, quá nhiều N ức chế sự tích tụ flavonoid ở các loài như Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis và Ginkgo biloba, đồng thời ảnh hưởng đến chất lượng dược liệu [34]. Việc bón phân P có hiệu quả trong việc tăng hàm lượng axit glycyrrhizinic và dihydroacetone trong cam thảo Ural [35]. Khi lượng bón vượt quá 0,12 kg, hàm lượng flavonoid tổng số trong Tussilago farfara giảm [36]. Việc sử dụng phân bón P có tác động tiêu cực đến hàm lượng polysaccharides trong rễ cây đa giác của y học cổ truyền Trung Quốc [37], nhưng phân bón K có hiệu quả trong việc tăng hàm lượng saponin của nó [38]. Bón phân 450 kg·hm−2 K là tốt nhất cho sự sinh trưởng và tích lũy saponin của Panax notoginseng hai năm tuổi [39]. Theo tỷ lệ N:P:K = 2:2:1, tổng lượng chiết xuất thủy nhiệt, harpagide và harpagoside là cao nhất [40]. Tỷ lệ N, P và K cao có lợi cho việc thúc đẩy sự phát triển của cây Pogostemon cablin và tăng hàm lượng tinh dầu dễ bay hơi. Tỷ lệ N, P và K thấp làm tăng hàm lượng các thành phần hiệu quả chính của tinh dầu lá thân cây Pogostemon cablin [41]. YCH là một loại cây chịu được đất cằn cỗi, và nó có thể có nhu cầu đặc biệt về các chất dinh dưỡng như N, P và K. Trong nghiên cứu này, so với YCH trồng trọt, đất của cây YCH hoang dã tương đối cằn cỗi: hàm lượng chất hữu cơ, tổng N, tổng P và tổng K trong đất lần lượt bằng khoảng 1/10, 1/2, 1/3 và 1/3 so với cây trồng trọt. Do đó, sự khác biệt về chất dinh dưỡng trong đất có thể là một lý do khác dẫn đến sự khác biệt giữa các chất chuyển hóa được phát hiện ở YCH trồng trọt và hoang dã. Weibao Ma và cộng sự. [42] nhận thấy việc bón phân N và P với một lượng nhất định đã cải thiện đáng kể năng suất và chất lượng hạt giống. Tuy nhiên, ảnh hưởng của các nguyên tố dinh dưỡng đến chất lượng YCH vẫn chưa rõ ràng, và các biện pháp bón phân để cải thiện chất lượng dược liệu cần được nghiên cứu thêm.Thuốc thảo dược Trung Quốc có đặc điểm “Môi trường thuận lợi thúc đẩy năng suất, môi trường bất lợi cải thiện chất lượng” [43]. Trong quá trình chuyển đổi dần dần từ YCH hoang dã sang YCH trồng trọt, môi trường sống của cây đã thay đổi từ thảo nguyên sa mạc khô cằn và cằn cỗi sang vùng đất nông nghiệp màu mỡ với nguồn nước dồi dào hơn. Môi trường sống của YCH trồng trọt tốt hơn và năng suất cao hơn, giúp đáp ứng nhu cầu thị trường. Tuy nhiên, môi trường sống tốt hơn này đã dẫn đến những thay đổi đáng kể trong các chất chuyển hóa của YCH; liệu điều này có giúp cải thiện chất lượng YCH hay không và làm thế nào để đạt được sản lượng YCH chất lượng cao thông qua các biện pháp canh tác dựa trên khoa học sẽ cần được nghiên cứu thêm.Trồng trọt mô phỏng môi trường sống là phương pháp mô phỏng môi trường sống và điều kiện môi trường của cây thuốc hoang dã, dựa trên kiến thức về khả năng thích nghi lâu dài của cây với các áp lực môi trường cụ thể [43]. Bằng cách mô phỏng các yếu tố môi trường khác nhau ảnh hưởng đến thực vật hoang dã, đặc biệt là môi trường sống ban đầu của thực vật được sử dụng làm nguồn nguyên liệu thuốc đích thực, phương pháp này sử dụng thiết kế khoa học và sự can thiệp sáng tạo của con người để cân bằng sự phát triển và quá trình trao đổi chất thứ cấp của thực vật thuốc Trung Quốc [43]. Các phương pháp này nhằm đạt được sự sắp xếp tối ưu cho việc phát triển các dược liệu chất lượng cao. Nuôi cấy mô phỏng môi trường sống sẽ cung cấp một phương pháp hiệu quả để sản xuất YCH chất lượng cao ngay cả khi cơ sở dược lực học, các dấu hiệu chất lượng và cơ chế phản ứng với các yếu tố môi trường vẫn chưa rõ ràng. Theo đó, chúng tôi đề xuất rằng các biện pháp thiết kế khoa học và quản lý đồng ruộng trong quá trình trồng trọt và sản xuất YCH nên được thực hiện có tính đến các đặc điểm môi trường của YCH hoang dã, chẳng hạn như điều kiện đất khô cằn, cằn cỗi và đất cát. Đồng thời, chúng tôi cũng hy vọng rằng các nhà nghiên cứu sẽ tiến hành nghiên cứu sâu hơn về cơ sở vật liệu chức năng và các dấu hiệu chất lượng của YCH. Những nghiên cứu này có thể cung cấp các tiêu chí đánh giá hiệu quả hơn cho YCH, đồng thời thúc đẩy sản xuất chất lượng cao và phát triển bền vững của ngành. -
Dầu thảo dược Fructus Amomi Máy khuếch tán massage tự nhiên 1kg Tinh dầu Amomum villosum số lượng lớn
Họ Zingiberaceae ngày càng thu hút sự chú ý trong nghiên cứu về tác dụng đối kháng do hàm lượng tinh dầu dễ bay hơi phong phú và hương thơm đặc trưng của các loài trong họ. Các nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng các hóa chất từ Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] và Zingiber officinale Rosc. [42] của họ gừng có tác dụng gây dị ứng lên sự nảy mầm của hạt và sự phát triển của cây con của ngô, rau diếp và cà chua. Nghiên cứu hiện tại của chúng tôi là báo cáo đầu tiên về hoạt động gây dị ứng của các chất dễ bay hơi từ thân, lá và quả non của A. villosum (một thành viên của họ Zingiberaceae). Năng suất dầu của thân, lá và quả non lần lượt là 0,15%, 0,40% và 0,50%, cho thấy quả tạo ra lượng dầu dễ bay hơi lớn hơn thân và lá. Các thành phần chính của dầu dễ bay hơi từ thân là β-pinene, β-phellandrene và α-pinene, đây là một mô hình tương tự như các hóa chất chính của dầu lá, β-pinene và α-pinene (hydrocarbon monoterpene). Mặt khác, dầu trong quả non giàu bornyl acetate và long não (monoterpene oxy hóa). Kết quả được hỗ trợ bởi các phát hiện của Do N Dai [30,32] và Hui Ao [31] người đã xác định được các loại dầu từ các cơ quan khác nhau của A. villosum.
Đã có một số báo cáo về hoạt động ức chế sinh trưởng thực vật của các hợp chất chính này ở các loài khác. Shalinder Kaur phát hiện ra rằng α-pinene từ bạch đàn làm giảm đáng kể chiều dài rễ và chiều cao thân của Amaranthus viridis L. ở nồng độ 1,0 μL [43], và một nghiên cứu khác cho thấy α-pinene ức chế sự phát triển rễ sớm và gây ra tổn thương oxy hóa trong mô rễ thông qua việc tăng sản sinh các loài oxy phản ứng [44]. Một số báo cáo cho rằng β-pinene ức chế sự nảy mầm và phát triển của cây con của cỏ dại thử nghiệm theo cách phản ứng phụ thuộc vào liều lượng bằng cách phá vỡ tính toàn vẹn của màng [45], thay đổi sinh hóa thực vật và tăng cường hoạt động của peroxidase và polyphenol oxidase [46]. β-Phellandrene thể hiện khả năng ức chế tối đa đối với sự nảy mầm và phát triển của Vigna unguiculata (L.) Walp ở nồng độ 600 ppm [47], trong khi đó, ở nồng độ 250 mg/m3, long não ức chế sự phát triển của rễ mầm và chồi của Lepidium sativum L. [48]. Tuy nhiên, nghiên cứu báo cáo về tác dụng gây dị ứng của bornyl acetate còn ít. Trong nghiên cứu của chúng tôi, tác dụng gây dị ứng của β-pinene, bornyl acetate và long não lên chiều dài rễ yếu hơn so với các loại tinh dầu dễ bay hơi, ngoại trừ α-pinene, trong khi tinh dầu lá, giàu α-pinene, cũng có độc tính thực vật cao hơn so với các loại tinh dầu dễ bay hơi tương ứng từ thân và quả của A. villosum, cả hai phát hiện đều chỉ ra rằng α-pinene có thể là hóa chất quan trọng gây dị ứng ở loài này. Đồng thời, kết quả cũng ngụ ý rằng một số hợp chất không phổ biến trong tinh dầu quả có thể góp phần tạo nên tác dụng gây dị ứng thực vật, một phát hiện cần được nghiên cứu thêm trong tương lai.Trong điều kiện bình thường, tác dụng gây dị ứng của các chất hóa học gây dị ứng là đặc hiệu cho từng loài. Jiang và cộng sự phát hiện ra rằng tinh dầu do Artemisia sieversiana sản xuất có tác dụng mạnh hơn đối với Amaranthus retroflexus L. so với Medicago sativa L., Poa annua L. và Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng. [49]. Trong một nghiên cứu khác, tinh dầu dễ bay hơi của cây Lavandula angustifolia Mill. tạo ra các mức độ tác động gây độc thực vật khác nhau trên các loài thực vật khác nhau. Lolium multiflorum Lam. là loài tiếp nhận nhạy cảm nhất, sự phát triển của hạ mầm và rễ mầm bị ức chế lần lượt 87,8% và 76,7% ở liều lượng dầu 1 μL/mL, nhưng sự phát triển của hạ mầm của cây giống dưa chuột hầu như không bị ảnh hưởng [20]. Kết quả của chúng tôi cũng cho thấy có sự khác biệt về độ nhạy cảm với các chất dễ bay hơi của A. villosum giữa L. sativa và L. perenne.Các hợp chất dễ bay hơi và tinh dầu của cùng một loài có thể thay đổi về mặt định lượng và/hoặc định tính do điều kiện sinh trưởng, bộ phận của cây và phương pháp phát hiện. Ví dụ, một báo cáo đã chứng minh rằng pyranoid (10,3%) và β-caryophyllene (6,6%) là những hợp chất chính của các chất dễ bay hơi phát ra từ lá Sambucus nigra, trong khi benzaldehyde (17,8%), α-bulnesene (16,6%) và tetracosane (11,5%) lại rất phổ biến trong các loại tinh dầu chiết xuất từ lá [50]. Trong nghiên cứu của chúng tôi, các hợp chất dễ bay hơi được giải phóng từ nguyên liệu thực vật tươi có tác dụng gây dị ứng mạnh hơn đối với cây thử nghiệm so với tinh dầu dễ bay hơi được chiết xuất, sự khác biệt về phản ứng có liên quan chặt chẽ đến sự khác biệt về thành phần hóa học dị ứng có trong hai chế phẩm. Sự khác biệt chính xác giữa các hợp chất dễ bay hơi và tinh dầu cần được nghiên cứu sâu hơn trong các thí nghiệm tiếp theo.Sự khác biệt về tính đa dạng của vi sinh vật và cấu trúc quần thể vi sinh vật trong các mẫu đất có bổ sung tinh dầu dễ bay hơi có liên quan đến sự cạnh tranh giữa các vi sinh vật cũng như bất kỳ tác động độc hại nào và thời gian tồn tại của tinh dầu dễ bay hơi trong đất. Vokou và Liotiri [51] phát hiện ra rằng việc áp dụng tương ứng của bốn loại tinh dầu (0,1 mL) cho đất canh tác (150 g) đã kích hoạt hô hấp của các mẫu đất, ngay cả khi các loại dầu khác nhau về thành phần hóa học của chúng, cho thấy rằng dầu thực vật được sử dụng làm nguồn cacbon và năng lượng bởi các vi sinh vật đất xảy ra. Dữ liệu thu được từ nghiên cứu hiện tại đã xác nhận rằng các loại dầu từ toàn bộ cây A. villosum đã góp phần làm tăng rõ rệt số lượng các loài nấm đất vào ngày thứ 14 sau khi bổ sung dầu, cho thấy rằng dầu có thể cung cấp nguồn cacbon cho nhiều loại nấm đất hơn. Một nghiên cứu khác đã báo cáo một phát hiện: các vi sinh vật đất đã phục hồi chức năng ban đầu và sinh khối của chúng sau một thời gian biến đổi tạm thời do việc bổ sung dầu Thymbra capitata L. (Cav), nhưng dầu ở liều cao nhất (0,93 µL dầu trên một gam đất) không cho phép các vi sinh vật đất phục hồi chức năng ban đầu [52]. Trong nghiên cứu hiện tại, dựa trên phân tích vi sinh vật của đất sau khi được xử lý với các ngày và nồng độ khác nhau, chúng tôi suy đoán rằng quần thể vi khuẩn đất sẽ phục hồi sau nhiều ngày hơn. Ngược lại, hệ vi sinh vật nấm không thể trở lại trạng thái ban đầu. Các kết quả sau đây xác nhận giả thuyết này: tác động rõ rệt của nồng độ dầu cao lên thành phần của hệ vi sinh vật nấm đất đã được tiết lộ bằng phân tích tọa độ chính (PCoA) và các bản đồ nhiệt một lần nữa xác nhận rằng thành phần quần thể nấm của đất được xử lý bằng 3,0 mg/mL dầu (tức là 0,375 mg dầu trên một gam đất) ở cấp độ chi khác biệt đáng kể so với các phương pháp xử lý khác. Hiện nay, nghiên cứu về tác động của việc bổ sung hydrocarbon monoterpene hoặc monoterpene oxy hóa lên sự đa dạng vi sinh vật đất và cấu trúc quần thể vẫn còn khan hiếm. Một số nghiên cứu báo cáo rằng α-pinene làm tăng hoạt động của vi sinh vật đất và sự phong phú tương đối của Methylophilaceae (một nhóm methylotrophs, Proteobacteria) trong điều kiện độ ẩm thấp, đóng vai trò quan trọng như một nguồn cacbon trong đất khô hơn [53]. Tương tự như vậy, tinh dầu dễ bay hơi của toàn bộ cây A. villosum, chứa 15,03% α-pinene (Bảng bổ sung S1), rõ ràng đã làm tăng sự phong phú tương đối của Proteobacteria ở mức 1,5 mg/mL và 3,0 mg/mL, điều này cho thấy α-pinene có thể hoạt động như một trong những nguồn cacbon cho vi sinh vật đất.Các hợp chất dễ bay hơi do các cơ quan khác nhau của A. villosum tạo ra có mức độ tác động dị hợp khác nhau lên L. sativa và L. perenne, có liên quan chặt chẽ đến các thành phần hóa học chứa trong các bộ phận của cây A. villosum. Mặc dù thành phần hóa học của tinh dầu dễ bay hơi đã được xác nhận, nhưng các hợp chất dễ bay hơi do A. villosum giải phóng ở nhiệt độ phòng vẫn chưa được biết rõ, cần được nghiên cứu thêm. Hơn nữa, tác dụng hiệp đồng giữa các hóa chất dị hợp khác nhau cũng đáng được xem xét. Về mặt vi sinh vật đất, để khám phá toàn diện tác động của tinh dầu dễ bay hơi lên vi sinh vật đất, chúng ta vẫn cần tiến hành nghiên cứu sâu hơn: kéo dài thời gian xử lý tinh dầu dễ bay hơi và phân biệt sự biến đổi thành phần hóa học của tinh dầu dễ bay hơi trong đất vào các ngày khác nhau. -
Tinh dầu Artemisia capillaris nguyên chất dùng để làm nến và xà phòng, tinh dầu khuếch tán bán buôn mới cho máy khuếch tán bằng đèn đốt sậy
Thiết kế mô hình loài gặm nhấm
Các con vật được chia ngẫu nhiên thành năm nhóm, mỗi nhóm mười lăm con. Nhóm đối chứng và nhóm mô hình được cho uống thuốc qua ống thông dạ dày.dầu mètrong 6 ngày. Chuột trong nhóm đối chứng dương tính được cho uống viên bifendate (BT, 10 mg/kg) trong 6 ngày. Các nhóm thí nghiệm được điều trị bằng 100 mg/kg và 50 mg/kg AEO hòa tan trong dầu mè trong 6 ngày. Vào ngày thứ 6, nhóm đối chứng được điều trị bằng dầu mè, và tất cả các nhóm khác được điều trị bằng một liều duy nhất CCl4 0,2% trong dầu mè (10 ml/kg).tiêm phúc mạc. Sau đó, chuột được nhịn ăn và không uống nước, các mẫu máu được lấy từ các mạch máu sau nhãn cầu; máu thu được được ly tâm ở tốc độ 3000 ×gtrong 10 phút để tách huyết thanh.Trật khớp cổđược thực hiện ngay sau khi lấy máu, và các mẫu gan được lấy ra ngay lập tức. Một phần mẫu gan được bảo quản ngay ở -20 °C cho đến khi phân tích, và phần còn lại được cắt bỏ và cố định trong dung dịch 10%.formalindung dịch; các mô còn lại được bảo quản ở nhiệt độ −80 °C để phân tích mô bệnh học (Wang và cộng sự, 2008,Hsu và cộng sự, 2009,Nie và cộng sự, 2015).
Đo các thông số sinh hóa trong huyết thanh
Tổn thương gan được đánh giá bằng cách ước tínhhoạt động của enzymeALT và AST huyết thanh bằng bộ dụng cụ thương mại tương ứng theo hướng dẫn sử dụng (Nam Kinh, tỉnh Giang Tô, Trung Quốc). Hoạt tính enzym được biểu thị bằng đơn vị trên lít (U/l).
Đo MDA, SOD, GSH và GSH-Pxtrong dịch đồng nhất gan
Mô gan được đồng nhất hóa với dung dịch muối sinh lý lạnh theo tỷ lệ 1:9 (w/v, gan:muối). Dịch đồng nhất được ly tâm (2500 ×gtrong 10 phút) để thu thập dịch nổi cho các lần xác định tiếp theo. Tổn thương gan được đánh giá dựa trên các phép đo nồng độ MDA và GSH cũng như SOD và GSH-P.xHoạt động. Tất cả các hoạt động này đều được xác định theo hướng dẫn trên bộ dụng cụ (Nam Kinh, tỉnh Giang Tô, Trung Quốc). Kết quả MDA và GSH được biểu thị bằng nmol trên mg protein (nmol/mg prot), và hoạt động của SOD và GSH-Pxđược biểu thị dưới dạng U trên mg protein (U/mg prot).
Phân tích mô bệnh học
Các phần gan mới lấy được đã được cố định trong dung dịch đệm 10%.paraformaldehyddung dịch phosphate. Sau đó, mẫu được nhúng trong parafin, cắt thành các phần 3–5 μm, nhuộm bằnghematoxylinVàeosin(H&E) theo một quy trình chuẩn và cuối cùng được phân tích bởikính hiển vi quang học(Tian và cộng sự, 2012).
Phân tích thống kê
Kết quả được biểu thị dưới dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (SD). Kết quả được phân tích bằng phần mềm thống kê SPSS Statistics, phiên bản 19.0. Dữ liệu được phân tích phương sai (ANOVA,p< 0,05) tiếp theo là kiểm định Dunnett và kiểm định Dunnett T3 để xác định sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các giá trị của các nhóm thử nghiệm khác nhau. Một sự khác biệt có ý nghĩa được xem xét ở mứcp< 0,05.
Kết quả và thảo luận
Thành phần của AEO
Sau khi phân tích GC/MS, người ta thấy AEO chứa 25 thành phần được giải hấp từ 10 đến 35 phút và 21 thành phần chiếm 84% tinh dầu đã được xác định (Bảng 1). Dầu dễ bay hơi chứamonoterpenoid(80,9%), sesquiterpenoid (9,5%), hydrocarbon bão hòa không phân nhánh (4,86%) và axetilen hỗn hợp (4,86%). So với các nghiên cứu khác (Guo và cộng sự, 2004), chúng tôi tìm thấy hàm lượng monoterpenoid dồi dào (80,90%) trong AEO. Kết quả cho thấy thành phần dồi dào nhất của AEO là β-citronellol (16,23%). Các thành phần chính khác của AEO bao gồm 1,8-cineole (13,9%),long não(12,59%),linalool(11,33%), α-pinene (7,21%), β-pinene (3,99%),thymol(3,22%) vàmyrcene(2,02%). Sự thay đổi trong thành phần hóa học có thể liên quan đến các điều kiện môi trường mà cây tiếp xúc, chẳng hạn như nước khoáng, ánh sáng mặt trời, giai đoạn phát triển vàdinh dưỡng.
-
Tinh dầu Saposhnikovia divaricata nguyên chất dùng để làm nến và xà phòng bán buôn tinh dầu khuếch tán mới cho máy khuếch tán bằng đèn đốt sậy
2.1. Chuẩn bị SDE
Thân rễ của cây SD được mua dưới dạng thảo dược khô từ Công ty Hanherb (Guri, Hàn Quốc). Các nguyên liệu thực vật đã được xác nhận về mặt phân loại bởi Tiến sĩ Go-Ya Choi thuộc Viện Đông y Hàn Quốc (KIOM). Một mẫu vật mẫu (số 2014 SDE-6) đã được gửi đến Viện Tiêu chuẩn Thảo dược Hàn Quốc. Thân rễ khô của cây SD (320 g) được chiết xuất hai lần bằng ethanol 70% (với thời gian hồi lưu 2 giờ) và sau đó được cô đặc dưới áp suất giảm. Dịch sắc được lọc, đông khô và bảo quản ở 4°C. Hiệu suất chiết xuất khô từ nguyên liệu thô là 48,13% (w/w).
2.2. Phân tích định lượng bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)
Phân tích sắc ký được thực hiện bằng hệ thống HPLC (Waters Co., Milford, MA, Hoa Kỳ) và đầu dò mảng quang diode. Đối với phân tích HPLC của SDE, nguyên liệu thôO-glucosylcimifugin tiêu chuẩn được mua từ Viện Xúc tiến Công nghiệp Y học Cổ truyền Hàn Quốc (Gyeongsan, Hàn Quốc) vàgiây-O-glucosylhamaudol và 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol được phân lập trong phòng thí nghiệm của chúng tôi và được xác định bằng phân tích quang phổ, chủ yếu là NMR và MS.
Mẫu SDE (0,1 mg) được hòa tan trong ethanol 70% (10 mL). Phân tách sắc ký được thực hiện bằng cột XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, Hoa Kỳ). Pha động bao gồm acetonitril (A) và 0,1% axit axetic trong nước (B) với lưu lượng 1,0 mL/phút. Chương trình gradient đa bước được sử dụng như sau: 5% A (0 phút), 5–20% A (0–10 phút), 20% A (10–23 phút) và 20–65% A (23–40 phút). Bước sóng phát hiện được quét ở 210–400 nm và ghi lại ở 254 nm. Thể tích tiêm là 10,0μL. Các dung dịch chuẩn để xác định ba chromone được chuẩn bị ở nồng độ cuối cùng là 7,781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol), và 31,125 mg/mL (giây-O-glucosylhamaudol) trong methanol và giữ ở nhiệt độ 4°C.
2.3. Đánh giá hoạt động chống viêmTrong ống nghiệm
2.3.1. Nuôi cấy tế bào và xử lý mẫu
Tế bào RAW 264.7 được lấy từ Bộ sưu tập Nuôi cấy Tiêu chuẩn Hoa Kỳ (ATCC, Manassas, VA, Hoa Kỳ) và được nuôi cấy trong môi trường DMEM chứa 1% kháng sinh và 5,5% FBS. Tế bào được ủ trong môi trường ẩm 5% CO2 ở 37°C. Để kích thích tế bào, môi trường được thay thế bằng môi trường DMEM mới và lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, Hoa Kỳ) ở 1μg/mL được thêm vào khi có hoặc không có SDE (200 hoặc 400μg/mL) trong vòng 24 giờ nữa.
2.3.2. Xác định Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Yếu tố hoại tử khối u-α(TNF-α), và sản xuất Interleukin-6 (IL-6)
Các tế bào được xử lý bằng SDE và kích thích bằng LPS trong 24 giờ. Sản xuất NO được phân tích bằng cách đo nitrit bằng thuốc thử Griess theo một nghiên cứu trước đây [12]. Tiết ra các cytokine gây viêm PGE2, TNF-αvà IL-6 được xác định bằng bộ xét nghiệm ELISA (hệ thống R&D) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Ảnh hưởng của SDE lên sản xuất NO và cytokine được xác định ở bước sóng 540 nm hoặc 450 nm bằng máy xét nghiệm Wallac EnVision.™máy đọc vi mạch (PerkinElmer).
2.4. Đánh giá hoạt động chống viêm xương khớpTrong cơ thể sống
2.4.1. Động vật
Chuột Sprague-Dawley đực (7 tuần tuổi) được mua từ Samtako Inc. (Osan, Hàn Quốc) và được nuôi trong điều kiện được kiểm soát với chu kỳ sáng/tối 12 giờ tại°C và% độ ẩm. Chuột được cung cấp chế độ ăn và nước uống trong phòng thí nghiệmtùy ý. Tất cả các quy trình thử nghiệm đều được thực hiện theo hướng dẫn của Viện Y tế Quốc gia (NIH) và được Ủy ban Chăm sóc và Sử dụng Động vật của trường đại học Daejeon (Daejeon, Hàn Quốc) chấp thuận.
2.4.2. Gây ra OA với MIA ở chuột
Các loài động vật được phân ngẫu nhiên và phân vào các nhóm điều trị trước khi bắt đầu nghiên cứu (mỗi nhóm). Dung dịch MIA (3 mg/50μL dung dịch muối 0,9% được tiêm trực tiếp vào khoang khớp của đầu gối phải dưới gây mê bằng hỗn hợp ketamine và xylazine. Chuột được chia ngẫu nhiên thành bốn nhóm: (1) nhóm muối không tiêm MIA, (2) nhóm MIA tiêm MIA, (3) nhóm được điều trị bằng SDE (200 mg/kg) tiêm MIA, và (4) nhóm được điều trị bằng indomethacin (IM) (2 mg/kg) tiêm MIA. Chuột được cho uống SDE và IM 1 tuần trước khi tiêm MIA trong 4 tuần. Liều lượng SDE và IM được sử dụng trong nghiên cứu này dựa trên liều lượng đã sử dụng trong các nghiên cứu trước đây [10,13,14].
2.4.3. Đo lường sự phân bố trọng lượng của bàn chân sau
Sau khi gây tê ngoài màng cứng (OA), sự cân bằng ban đầu về khả năng chịu lực của chân sau bị phá vỡ. Một máy kiểm tra khả năng chịu lực (thiết bị Linton, Norfolk, Anh) đã được sử dụng để đánh giá những thay đổi trong khả năng chịu lực. Chuột được đặt cẩn thận vào buồng đo. Lực chịu lực do chân sau tác dụng được tính trung bình trong khoảng thời gian 3 giây. Tỷ lệ phân bổ trọng lượng được tính theo công thức sau: [trọng lượng trên chân sau phải/(trọng lượng trên chân sau phải + trọng lượng trên chân sau trái)] × 100 [15].
2.4.4. Đo nồng độ Cytokine huyết thanh
Các mẫu máu được ly tâm ở tốc độ 1.500 g trong 10 phút ở 4°C; sau đó huyết thanh được thu thập và bảo quản ở −70°C cho đến khi sử dụng. Nồng độ IL-1β, IL-6, TNF-αvà PGE2 trong huyết thanh được đo bằng bộ dụng cụ ELISA từ R&D Systems (Minneapolis, MN, Hoa Kỳ) theo hướng dẫn của nhà sản xuất.
2.4.5. Phân tích RT-PCR định lượng thời gian thực
Tổng RNA được chiết xuất từ mô khớp gối bằng thuốc thử TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Hoa Kỳ), phiên mã ngược thành cDNA và khuếch đại PCR bằng bộ kit TM One Step RT PCR với SYBR green (Applied Biosystems, Grand Island, NY, Hoa Kỳ). PCR định lượng thời gian thực được thực hiện bằng hệ thống PCR thời gian thực Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, Hoa Kỳ). Trình tự mồi và trình tự đầu dò được trình bày trong Bảng 1.1. Các phần mẫu cDNA và một lượng tương đương cDNA GAPDH được khuếch đại bằng hỗn hợp PCR master TaqMan® Universal có chứa DNA polymerase theo hướng dẫn của nhà sản xuất (Applied Biosystems, Foster, CA, Hoa Kỳ). Điều kiện PCR là 2 phút ở 50°C, 10 phút ở 94°C, 15 giây ở 95°C và 1 phút ở 60°C trong 40 chu kỳ. Nồng độ gen mục tiêu được xác định bằng phương pháp so sánh Ct (số chu kỳ ngưỡng tại điểm giao nhau giữa biểu đồ khuếch đại và ngưỡng), theo hướng dẫn của nhà sản xuất.
