Dầu Saposhnikovia divaricata nguyên chất dùng làm nến và xà phòng bán buôn tinh dầu khuếch tán mới cho máy khuếch tán đầu đốt sậy

Dầu Saposhnikovia divaricata nguyên chất dùng làm nến và xà phòng bán buôn tinh dầu khuếch tán mới dành cho máy khuếch tán đầu đốt sậy Hình ảnh nổi bật

mô tả ngắn gọn:

2.1. Chuẩn bị SDE

Thân rễ của SD được mua dưới dạng thảo mộc khô từ Công ty Hanherb (Guri, Hàn Quốc). Nguyên liệu thực vật đã được xác nhận về mặt phân loại bởi Tiến sĩ Go-Ya Choi thuộc Viện Đông y Hàn Quốc (KIOM). Một mẫu chứng từ (số 2014 SDE-6) đã được gửi vào Phòng tiêu chuẩn Tài nguyên Thảo dược Tiêu chuẩn Hàn Quốc. Thân rễ khô của SD (320 g) được chiết hai lần bằng etanol 70% (với hồi lưu trong 2 giờ) và dịch chiết sau đó được cô đặc dưới áp suất giảm. Nước sắc được lọc, đông khô và bảo quản ở 4°C. Hiệu suất chiết khô từ nguyên liệu thô ban đầu là 48,13% (w/w).

2.2. Phân tích sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) định lượng

Phân tích sắc ký được thực hiện với hệ thống HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) và máy dò mảng photodiode. Để phân tích HPLC của SDE, bước cơ bảnOTiêu chuẩn -glucosylcimifugin được mua từ Viện Xúc tiến Công nghiệp Y học Cổ truyền Hàn Quốc (Gyeongsan, Hàn Quốc) vàgiây-O-glucosylhamaudol và 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol được phân lập trong phòng thí nghiệm của chúng tôi và được xác định bằng phân tích quang phổ, chủ yếu bằng NMR và MS.

Các mẫu SDE (0,1 mg) được hòa tan trong ethanol 70% (10 mL). Việc phân tách sắc ký được thực hiện bằng cột XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Pha động bao gồm axetonitril (A) và axit axetic 0,1% trong nước (B) với tốc độ dòng 1,0 mL/phút. Chương trình gradient nhiều bước đã được sử dụng như sau: 5% A (0 phút), 5–20% A (0–10 phút), 20% A (10–23 phút) và 20–65% A (23–40 phút) ). Bước sóng phát hiện được quét ở bước sóng 210–400 nm và được ghi ở bước sóng 254 nm. Lượng phun là 10,0μL. Dung dịch chuẩn để xác định ba nhiễm sắc được chuẩn bị ở nồng độ cuối cùng là 7,781 mg/mL (nguyên chất-O-glucosylcimifugin), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisamminol) và 31,125 mg/mL (giây-O-glucosylhamaudol) trong metanol và giữ ở 4°C.

2.3. Đánh giá hoạt động chống viêmTrong ống nghiệm

2.3.1. Nuôi cấy tế bào và xử lý mẫu

Tế bào RAW 264,7 được lấy từ Bộ sưu tập Văn hóa Kiểu Mỹ (ATCC, Manassas, VA, USA) và được nuôi cấy trong môi trường DMEM chứa 1% kháng sinh và 5,5% FBS. Các tế bào được ủ trong môi trường ẩm có 5% CO2 ở 37°C. Để kích thích tế bào, môi trường được thay thế bằng môi trường DMEM mới và lipopolysacarit (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) ở mức 1μg/mL được thêm vào khi có hoặc không có SDE (200 hoặc 400μg/mL) trong 24 giờ nữa.

2.3.2. Xác định Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Yếu tố hoại tử khối u-α(TNF-α) và sản xuất Interleukin-6 (IL-6)

Các tế bào được xử lý bằng SDE và kích thích bằng LPS trong 24 giờ. Sản xuất NO được phân tích bằng cách đo nitrit bằng thuốc thử Griess theo một nghiên cứu trước đó [12]. Sự tiết ra các cytokine gây viêm PGE2, TNF-αvà IL-6 được xác định bằng bộ ELISA (hệ thống R&D) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Tác động của SDE đối với việc sản xuất NO và cytokine được xác định ở bước sóng 540 nm hoặc 450 nm bằng Wallac EnVision™đầu đọc vi đĩa (PerkinElmer).

2.4. Đánh giá hoạt động chống viêm xương khớpở Vivo

2.4.1. Động vật

Chuột đực Sprague-Dawley (7 tuần tuổi) được mua từ Samtako Inc. (Osan, Hàn Quốc) và được nuôi trong điều kiện được kiểm soát với chu kỳ sáng/tối 12 giờ ở°C và% độ ẩm. Chuột được cung cấp chế độ ăn và nước uống trong phòng thí nghiệmtùy ý. Tất cả các quy trình thí nghiệm được thực hiện tuân thủ hướng dẫn của Viện Y tế Quốc gia (NIH) và được phê duyệt bởi Ủy ban Chăm sóc và Sử dụng Động vật của trường đại học Daejeon (Daejeon, Hàn Quốc).

2.4.2. Cảm ứng viêm khớp với MIA ở chuột

Các con vật được chọn ngẫu nhiên và phân vào các nhóm điều trị trước khi bắt đầu nghiên cứu (mỗi nhóm). Dung dịch MIA (3 mg/50μL dung dịch muối 0,9%) được tiêm trực tiếp vào khoang nội khớp của đầu gối phải dưới hình thức gây mê bằng hỗn hợp ketamine và xylazine. Chuột được chia ngẫu nhiên thành bốn nhóm: (1) nhóm nước muối không tiêm MIA, (2) nhóm MIA được tiêm MIA, (3) nhóm được điều trị bằng SDE (200 mg/kg) bằng tiêm MIA và (4 ) nhóm được điều trị bằng indomethacin- (IM-) (2 mg/kg) bằng cách tiêm MIA. Chuột được cho uống SDE và IM 1 tuần trước khi tiêm MIA trong 4 tuần. Liều lượng SDE và IM được sử dụng trong nghiên cứu này dựa trên liều lượng được sử dụng trong các nghiên cứu trước đó [10,13,14].

2.4.3. Các phép đo phân bố trọng lượng của chân sau

Sau khi gây ra viêm khớp, sự cân bằng ban đầu về khả năng chịu trọng lượng của chân sau đã bị phá vỡ. Một máy kiểm tra khả năng chịu lực (thiết bị Linton, Norfolk, Vương quốc Anh) đã được sử dụng để đánh giá những thay đổi về khả năng chịu trọng lượng. Chuột được đặt cẩn thận vào buồng đo. Lực chịu trọng lượng do chi sau tác dụng được tính trung bình trong khoảng thời gian 3 giây. Tỷ lệ phân bổ trọng lượng được tính theo phương trình sau: [trọng lượng ở chân sau bên phải/(trọng lượng ở chân sau bên phải + trọng lượng ở chân sau bên trái)] × 100 [15].

2.4.4. Đo nồng độ Cytokine trong huyết thanh

Các mẫu máu được ly tâm ở tốc độ 1.500 g trong 10 phút ở 4°C; sau đó huyết thanh được thu thập và bảo quản ở −70 ° C cho đến khi sử dụng. Mức độ IL-1β, IL-6, TNF-αvà PGE2 trong huyết thanh được đo bằng bộ ELISA từ Hệ thống R&D (Minneapolis, MN, Hoa Kỳ) theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

2.4.5. Phân tích RT-PCR định lượng theo thời gian thực

Tổng RNA được chiết xuất từ mô khớp gối bằng thuốc thử TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), sao chép ngược thành cDNA và khuếch đại PCR bằng bộ TM One Step RT PCR với màu xanh lá cây SYBR (Hệ sinh học ứng dụng , Đảo Grand, NY, Hoa Kỳ). PCR định lượng thời gian thực được thực hiện bằng hệ thống PCR thời gian thực 7500 của Hệ thống sinh học ứng dụng (Hệ thống sinh học ứng dụng, Grand Island, NY, Hoa Kỳ). Trình tự mồi và trình tự thăm dò được thể hiện trong Bảng1. Các phần cDNA mẫu và một lượng cDNA GAPDH tương đương được khuếch đại bằng hỗn hợp chính TaqMan® Universal PCR có chứa DNA polymerase theo hướng dẫn của nhà sản xuất (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Điều kiện PCR là 2 phút ở 50°C, 10 phút ở 94°C, 15 giây ở 95°C và 1 phút ở 60°C trong 40 chu kỳ. Theo hướng dẫn của nhà sản xuất, nồng độ của gen mục tiêu được xác định bằng phương pháp so sánh Ct (số chu kỳ ngưỡng tại điểm giao nhau giữa biểu đồ khuếch đại và ngưỡng).

Giá FOB:0,5 USD - 9,999 USD / Cái

Số lượng đặt hàng tối thiểu:100 cái/cái

Khả năng cung cấp:10000 mảnh / mảnh mỗi tháng

Gửi email cho chúng tôi

Chi tiết sản phẩm

Thẻ sản phẩm

Viêm xương khớp (OA) là rối loạn cơ xương thường gặp nhất và là bệnh thoái hóa khớp phổ biến nhất ở người cao tuổi [1]. Viêm khớp là tình trạng một phần do chấn thương, mất cấu trúc và chức năng của sụn, rối loạn điều hòa các con đường tiền viêm và chống viêm [2,3]. Nó chủ yếu ảnh hưởng đến sụn khớp và xương dưới sụn của khớp hoạt dịch và dẫn đến suy khớp, dẫn đến đau khi mang vật nặng bao gồm cả đi và đứng.4].

Không có cách chữa trị viêm khớp vì rất khó phục hồi sụn một khi nó bị phá hủy [5]. Mục tiêu của việc điều trị là giảm đau, duy trì hoặc cải thiện khả năng vận động của khớp, tăng sức mạnh của khớp và giảm thiểu tác động tàn tật của bệnh. Các phương pháp điều trị viêm khớp bằng thuốc nhằm mục đích giảm đau nhằm tăng cường chức năng khớp và chất lượng cuộc sống của bệnh nhân. Mặc dù sự phá hủy sụn là sự kiện chính trong viêm khớp, sự thoái hóa collagen là sự cố cơ bản quyết định sự tiến triển không thể đảo ngược của viêm khớp liên quan đến viêm [6,7]. Các phương pháp điều trị có hoạt tính chống viêm và bảo vệ sụn được kỳ vọng sẽ giảm đau và duy trì tính toàn vẹn của chất nền ở bệnh nhân viêm khớp.

Do đó, giảm viêm có thể sẽ có lợi trong việc quản lý viêm khớp. Các nghiên cứu gần đây cho thấy vai trò bảo vệ của các nguồn thảo dược đối với sự tiến triển của viêm khớp, về mặt giảm thiểu tình trạng viêm tế bào sụn và phá hủy sụn hơn nữa, thông qua khả năng tương tác với các mô liên quan đến khớp, dẫn đến giảm đau khớp [8].

Gốc củaSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) đã được sử dụng rộng rãi trong y học cổ truyền để điều trị đau đầu, đau nhức, viêm và viêm khớp ở Hàn Quốc và Trung Quốc [9,10]. Tác dụng dược lý đa dạng củaSaposhnikovia divaricata(SD) cũng bao gồm các đặc tính chống viêm, giảm đau, hạ sốt và chống viêm khớp [9,11]. Một nghiên cứu gần đây đã chứng minh rằng chiết xuất chromone SD có tác dụng chống viêm khớp dạng thấp tiềm năng trên mô hình chuột bị viêm khớp do collagen [10]; tuy nhiên, một số nghiên cứu đã được tiến hành để hỗ trợ hoạt động chống viêm và chống viêm khớp củaSaposhnikovia divaricatachiết xuất (SDE).

Do đó, nghiên cứu hiện tại đã điều tra các hoạt động chống viêm và chống viêm xương khớp của chiết xuất SD 70% ethanol. Đầu tiên, tác dụng chống viêm của SDE được đánh giátrong ống nghiệmtrong tế bào RAW 264,7 do LPS tạo ra. Tiếp theo, tác dụng chống viêm xương khớp của SDE được đo lường bằng cách đánh giá sự phân bố chịu trọng lượng, sự thoái hóa của sụn khớp và phản ứng viêm trong mô hình chuột bị viêm khớp do monosodium iodoacetate- (MIA-).